種子TTC染色液的正確使用方法

TTC（2，3，5-氯化三苯基四氮唑），是一種脂溶性光敏感復(fù)合物，可用于檢測種子的生存能力，或檢測哺乳動物組織的缺血梗塞。其基本原理在于，TTC是呼吸鏈中吡啶——核苷結(jié)構(gòu)酶系統(tǒng)的質(zhì)子受體，能與正常組織中的脫氫酶反應(yīng)生成不溶于水的紅色三苯基甲臜（TTF）化合物。正常組織和有活力的種子中富含脫氫酶，可與TTC反應(yīng)呈現(xiàn)紅色，如果組織缺血梗塞死亡或種子生活力衰退，則不能與TTC反應(yīng)，組織不能著色或染色很淺。據(jù)此可根據(jù)染色部位和深淺判定組織缺血梗塞程度或種子活力。

本產(chǎn)品TTC染液中TTC濃度為0.1%，適用于植物種子活力的染色。經(jīng)染色后，有活力的種子呈紅色，無生命力的種子呈白色或黃色。

操作步驟

樣本前處理：種子放入水中30-35℃浸泡2-6 h或更長時間，使其充分吸脹。

染色步驟

1. TTC染液經(jīng)37℃預(yù)熱30 min。

2. 種子剝離外殼或種皮，縱切均分成兩瓣，放入潔凈的離心管中。加入TTC染色（種子）浸沒樣本，37℃水浴鍋避光染色30-60 min，期間每隔15 min觀察種子著色情況。

3. 當(dāng)種子出現(xiàn)紅色且不再變深時即可倒出染液，向容器內(nèi)緩慢加入固定液（推薦G1101）浸沒組織終止染色反應(yīng)。樣本需避光保存。

4. 拍照前取出組織，用濾紙吸干固定液，根據(jù)需要用照相機拍照。

注意事項

1. 染色后的樣本易褪色，需盡快拍照。

2. 為了您的安全和健康，操作時請穿實驗服并佩戴一次性手套。

種子TTC染色液的正確使用方法