信帆生物專業(yè)提供多酚氧化酶，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定，*，確保銷(xiāo)售給客戶的產(chǎn)品是能夠符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),適合客戶要求的產(chǎn)品。本產(chǎn)品*，歡迎新老客戶前來(lái)咨詢訂購(gòu).

測(cè)定意義：                          

PPO（EC1.10.3.1）主要存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，是一種含銅的氧化酶，能使一元酚和二元酚氧化產(chǎn)生醌，從而引起褐化，與果蔬加工、茶葉品質(zhì)和組培等密切相關(guān)。

測(cè)定原理：

PPO能夠催化鄰苯二酚產(chǎn)生醌，后者在525nm有特征光吸收。

需自備的儀器和用品：

可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

試劑組成和配制：

提取液×1瓶，4℃保存；

試劑一×1瓶，4℃保存；

試劑二×1瓶，4℃保存；

試劑三×1瓶，4℃保存；

粗酶液提取：

1、收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照每500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（功率20％，超聲3秒，間隔10秒，重復(fù)30次）；8000g 4℃離心10分鐘，取上清，置冰上待測(cè)。

2、稱取約0.1g組織，加入1mL提取液進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10分鐘，取上清，置冰上待測(cè)。

測(cè)定步驟：

1. 分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至525nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 樣本測(cè)定（在EP管中依次加入下列試劑）

37℃(哺乳動(dòng)物)或25℃（其它物種）中準(zhǔn)確水浴10min后，迅速放入冰浴中冷卻

充分混勻，5000g，常溫離心10min，收集上清，取200μL至微量石英比色皿或96孔板中，525nm處檢測(cè)測(cè)定管和對(duì)照管吸光度，計(jì)算ΔA=A測(cè)定-A對(duì)照。

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