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植物組織蔗糖(sucrose)含量檢測原理!

點擊次數:2298     更新時間:2021-11-22

植物組織蔗糖(sucrose)含量檢測原理!

蔗糖是植物光合作用的主要產物,也是糖分運輸和儲藏的主要形式。因此,測定蔗糖含量對于植物糖代謝具有重要意義。此外,蔗糖含量是飲料﹑蜂蜜、果脯﹑糖果和乳制品等產品質量控制的重要指標之一。

測定原理:

酸性條件下蔗糖水解生成葡萄糖和果糖,果糖進一步與間苯二酚反應,生成有色物質,在480nm下有特征吸收峰。

所需的儀器和用品:

可見分光光度計、水浴鍋、可調式移液器、1mL玻璃比色皿蒸餾水

試劑的組成和配制:

提取液:液體 100ml×1瓶,4℃保存;

試劑一:液體10mL×1瓶,4℃保存;

試劑二:液體5ml×1瓶,4℃保存;

試劑三:液體 40ml×1瓶,4℃保存;

試劑四:液體 10ml×1瓶,4℃保存;

試劑五:粉劑0.5g×1瓶,常溫保存

蔗糖提取:

稱取約0.1g樣本,常溫研碎,加入1mL提取液,適當研磨后快速轉移到離心管中,置于80℃水浴鍋中10min,振蕩3~5次,冷卻后,離心取上清,加入2mg試劑五,80℃脫色30min,再加入1mL提取液,離心后取上清液測定。

測定操作表(在1.5mL EP管中依次加入下列試劑):

試劑(μL

空白管

標準管

測定管

樣本



100

試劑一


100


蒸餾水

100



試劑二

50

50

50

   混勻,100'C煮沸5min左右(蓋緊,防止水分散失)

試劑三

700

700

700

試劑四

200

200

200

混勻,80℃水浴內反應10min左右,冷卻后測定480nm處光吸收值,空白管、標準管和測定管分別記為A1A2A3

蔗糖含量計算:

1、按照蛋白質含量計算

蔗糖含量(mg/mg prot )=1mg/mL ×(A3A1)÷A2A1) ÷蛋白濃度mg/mL

2、按照樣品質量計算

蔗糖含量(mg/g鮮重)=1mg/mL ×(A3A1)÷A2A1) ÷樣品鮮重g/mL

 

本產品僅供科研實驗用,不做其它用途!

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