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IgM 類單克隆抗體純化試劑盒使用說明書
立可純C080202（50ML 純化量）
試劑原理：
本試劑盒利用不同類別免疫球蛋白結構特性，通過大量實驗分析驗證而得到
的一個與傳統純化*不同的精細的具有高活性、高產率、快速以及良好重
復性的單克隆抗體的純化方法，本試劑盒所用材料對人體沒有損害，安全環
保。
試劑特點：
本試劑盒特點在于純化操作的簡單化、所得抗體的高活性和高純
度。實驗表明，本試劑盒可以得到95%左右純度的抗體；并且由于配方考究，
抗體在純化過程中幾乎沒有損傷，*保持應有的活性，實際應用*。
適用范圍：
本試劑盒僅適用于小鼠IgM 類單克隆抗體腹水的純化，不能用于其它
Ig 類或亞類單克隆抗體腹水的純化實驗，如需要可選擇立可純系列其它貨號
的純化試劑，它能為您帶來滿意結果。
試劑組成：
試劑名稱數量試劑名稱數量
純化液A 65ml 30X 濃縮透析液150ml
純化液B 50mL 透析袋1 根
純化液C 30mL 說明書1 份
純化液D 40mL 空白不干膠標簽2 片
純化步驟：
1、將單克隆抗體腹水從冰箱中取出，室溫避光放置15 分鐘，然
后用涼水邊沖邊搖勻快速解凍。
2、將化開的單克隆抗體腹水12000RPM 4-37℃離心10-20 分鐘。
3、先吸棄zui上面浮沫和油脂，然后將上清轉出到另一個干凈容器或離心管；
按每1 毫升單克隆抗體腹水加入純化液A 1.3 毫升，室溫避光倒轉20 分。
4、8000RPM 4-37℃離心10-20 分鐘，沉淀用純化液B 溶解到原單克隆抗體腹
水1/2 體積；再按每毫升加入純化液C 1.2 毫升，室溫避光倒轉10 分鐘。
5、8000RPM 4-37℃離心10-20 分鐘，棄沉淀收集上清；每1.1 毫升上清液加
純化液D 1.2 毫升，室溫避光倒轉20 分鐘。
6、8000RPM 4-37℃離心10-20 分鐘，收集沉淀用純化液B 收集溶解沉淀到原
單克隆抗體腹水體積的1/2。
7、透析袋用PBST 浸泡3-5 分鐘，然后用手揉捏數次，自來水沖凈后接純水沖
洗干凈，將純化好的抗體放入用透析夾或繩扎緊。
8、透析液用純水稀釋30 倍，將要透析的抗體袋子放入?？贵w體積：透析液體
積=1:50，4℃攪拌透析每次1 小時，共3-4 次。
9、8000RPM 4-37℃離心10-20 分鐘，收集上清測蛋白濃度并調控在5mg/ml
左右zui后加10/萬NaN3 防腐并除菌過濾4℃備用。
注意事項：
1、溶血和腐敗的腹水不得用于純化（血性腹水離心后除去紅細胞等可正常純
化）。
2、離心溫度不要超過37℃。
3、操作和量取試劑要細致。
4、不攪拌透析每次時間不得低于2 小時。

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