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硫氧還蛋白過氧化物酶（TPX）實驗代測

生物化學與分子生物學（一級學科），酶（二級學科）
測定意義：TPX屬于過氧化物酶家族,在體內主要通過還原過氧化氫和一些氫過氧化物來實現(xiàn)抗氧化作用,功能與GPX類似,也是谷胱甘肽氧化還原循環(huán)關鍵酶之一。TPX普遍存在于各種生物體內。如酵母、植物、動物、原生動物、寄生蟲、細菌和古細菌,在進化上高度保守。TPX與細胞增殖、分化、細胞凋亡及腫瘤發(fā)生調控密切相關。TPX的主要功能包括細胞脫毒、抗調節(jié)由過氧化氫介導的信號轉導和免疫反應。
測定原理：TPX催化H2O2氧化二硫蘇糖醇(DTT),H2O2的吸收波長為240nm,通過測定240nm吸光度的下降速率,通過對照減去過氧化氫酶(CAT)催化分解的H2O2,即可計算出TPX活性。因此，本試劑盒可以同時測定樣品TPX和CAT活性。
自備實驗用品及儀器：紫外分光光度計、低溫離心機、水浴鍋、可調節(jié)移液器、1mL石英比色皿和蒸餾水。
粗酶液提取：1、組織:按照組織質量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行冰浴勻漿。8000g,4℃離心10min,取上清置冰上待測。
2、細菌、真菌:按照細胞數(shù)量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后8000g,4℃,離心10min,取上清置于冰上待測。
3、血清等液體:直接測定

硫氧還蛋白過氧化物酶（TPX）實驗代測