RIPA裂解液（帶PMSF）RIPA裂解液對動物細(xì)胞胞膜、胞漿、胞核成分有較強(qiáng)裂解作用，是常用的細(xì)胞組織快速裂解液。使用RIPA 裂解液加強(qiáng)型特別適于western blot和大多數(shù)蛋白-蛋白相互作用的實驗等。PMSF能抑制蛋白酶對蛋白的降解。

產(chǎn)品型號：

更新時間：2025-02-10

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詳細(xì)介紹

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RIPA裂解液（帶PMSF)RIPA主要是從動物組織和動物細(xì)胞中抽取的可溶性蛋白。

RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer)是一種傳統(tǒng)的細(xì)胞組織快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白樣品可以用于常規(guī)的Western、IP等。RIPA的本意是RadImmunoprecipitation Assay。RIPA裂解液的配方有很多種，根據(jù)其裂解液的強(qiáng)度大致可以分為強(qiáng)、中、弱三類。關(guān)于不同的RIPA裂解液以及我們生物試劑的其它裂解液的主要特點和差異，以及如何選擇裂解液可參考附錄。

使用方法

編輯

對于培養(yǎng)細(xì)胞樣品：

1. 融解RIPA裂解液，混勻。取適當(dāng)量的裂解液，在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入PMSF，使PMSF的濃度為1mM。

2.對于貼壁細(xì)胞：去除培養(yǎng)液，用PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血清中的蛋白沒有干擾，可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常裂解液接觸細(xì)胞1-2秒后，細(xì)胞就會被裂解。

對于懸浮細(xì)胞：離心收集細(xì)胞，用手指把細(xì)胞用力彈散。按照6孔板每孔細(xì)胞加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多，必需分裝成50-100萬細(xì)胞/管，然后再裂解。

裂解液用量說明：通常6孔板每孔細(xì)胞加入150微升裂解液已經(jīng)足夠，但如果細(xì)胞密度非常高可以適當(dāng)加大裂解液的用量到200微升或250微升。

RIPA裂解液（帶PMSF)