甘油含量 (Glycerol)測定試劑盒

（適用于做組織樣本）

測定原理:

在 ATP 存在下甘油被甘油激酶磷酸化為 3-磷酸甘油，再被甘油磷酸氧化酶氧化產(chǎn)生過氧化氫:在過氧化氫酶作用下生色底物轉(zhuǎn)化為苯醒亞胺，光密度值與甘油濃度成正比。

所需設(shè)備：

酶標儀、可見光分光光度計 (721、722 型)、生化分析儀。

操作過程：

1、樣本處理:詳見說明書或本公司-技術(shù)文章部分關(guān)于樣本處理的說明。測定組織和細胞同時需要測定蛋白濃度。可用本所的 A045-2 總蛋白定量測試盒(考馬斯亮藍法)或者 A045-3、A045-4 總蛋白定量測試盒(BCA 法)進行蛋白濃度的測定。

2、標準品稀釋

用蒸餾水、生理鹽水或與樣品緩沖液一致的液體，將 4mM 甘油標準品倍比稀釋為1000、500、250、125、62.5、31.25、15.625、7.8125 mol/L，通常 4~6 管即可，注意設(shè)置 0 濃度對照反應(yīng)管。

計算：

1、繪制標準曲線并計算甘油濃度。Excel 作圖步驟: 各標準管 OD 值為y軸，標準品濃度為x軸。 鼠標左鍵圈住數(shù)據(jù)，點擊做圖向?qū)?，選擇-散點圖-，點擊-完成-。@ 鼠標右鍵點圖上的某一點，點擊-添加趨勢線-，點擊-選項-，點擊-顯示公式-和-R2值-。

2、以 mg 蛋白濃度或細胞數(shù)校正甘油含量。

甘油含量 (Glycerol)測定試劑盒