Cu 2+ - ATP 酶測(cè)試盒

（100 管/50 樣）

一、測(cè)定原理：

ATP 酶可分解 ATP 生成 ADP 及無(wú)機(jī)磷，測(cè)定無(wú)機(jī)磷的

量可判斷 ATP 酶活力的高低。Cu 2+ -ATPase 酶是一種能被

鉀激活而可被釩酸抑制的酶。

三、規(guī)范操作步驟：

１、樣本前處理：

準(zhǔn)確稱取組織重量，按重量（g）︰體積（mL）=1

︰9 的比例，加入 9 倍體積的生理鹽水，冰水浴條件下

機(jī)械勻漿，制備成 10%的組織勻漿，2500 轉(zhuǎn)/分，離心

10 分鐘，取得的上清液再用生理鹽水按 1︰4 稀釋制備

成 2%的組織勻漿。（具體操作見(jiàn)我所《實(shí)驗(yàn)方法學(xué)》）

四、簡(jiǎn)便操作法：（如果您的樣本量很大，您可以參考此方法）

1、測(cè)試前將對(duì)照管試劑及測(cè)定管試劑分別配成混合試劑 A

液和 B 液，具體配法如下：

根據(jù)規(guī)范操作表中各管的試劑量乘以您所需要測(cè)

試的樣本數(shù)（n）再放 1～2 只管的量（避免吸到最后試

劑量不夠）然后縱向混合成 A 液（對(duì)照管的加入液）及

B 液（測(cè)定管的加入液）

六、測(cè)定意義：

ATP 酶存在于組織細(xì)胞膜及細(xì)胞器膜上，是生物膜上

的一種蛋白酶，它在物質(zhì)運(yùn)送、能量轉(zhuǎn)換以及信息傳遞方

面具有重要的作用，機(jī)體在缺 O2及一些疾病狀態(tài)下，此酶

活力發(fā)生一系列改變，另外有些遺傳疾病也與此酶活力的

高低有關(guān)。

七、注意點(diǎn)：

1、 此法具有微量、靈敏、快速的特點(diǎn)。所以對(duì)測(cè)定所用試管

要求嚴(yán)格，要沒(méi)有一點(diǎn)磷，若試管放過(guò)磷酸或磷酸鹽緩沖

液，一定要洗得非常干凈，要先用洗潔精加水煮，再用自

來(lái)水沖，最后用雙蒸水沖干凈。用一次性塑料管或新

玻璃管，避免磷污染是檢測(cè)成敗的關(guān)鍵。

2、 定磷劑配好后，不可放置太久，一般保存一天，現(xiàn)用

現(xiàn)配。隨時(shí)放冰箱。

3、 采用先配測(cè)定管和對(duì)照管混合液，然后按簡(jiǎn)化操作步

驟進(jìn)行檢測(cè)，這樣快捷、準(zhǔn)確。

4、 所有配試劑的器皿均要專(zhuān)用，包括吸硫酸的吸管及盛水的器皿。

5、本研究所有加厚的一次性塑料試管供應(yīng)，請(qǐng)?jiān)谟嗁?gòu)試劑的

同時(shí)訂購(gòu)一次性塑料試管。

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